植物達(dá)瑪烷二醇合酶(DS)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

　　產(chǎn)品編號(hào)：BS-258251

　　BS-258251-A植物達(dá)瑪烷二醇合酶(DS)ELISA檢測(cè)試劑盒96T

　　BS-258251-B植物達(dá)瑪烷二醇合酶(DS)ELISA檢測(cè)試劑盒48T

　　檢測(cè)范圍：0.5-2000 pg/mL(具體以實(shí)際試劑盒為準(zhǔn))

　　適用樣本：植物組織提取液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等

　　一、試劑盒組成

　　預(yù)包被微孔板：96孔(DS抗原特異性抗體包被)

　　標(biāo)準(zhǔn)品：2瓶?jī)龈善?濃度梯度：2000/1000/500/250/125/62.5/31.25/0 pg/mL)

　　檢測(cè)試劑：

　　生物素化DS抗體(1:100稀釋)

　　HRP標(biāo)記鏈霉親和素(1:100稀釋)

　　緩沖液：

　　樣品稀釋液(PBS含1% BSA)

　　洗滌液(20×濃縮，需25倍稀釋)

　　顯色系統(tǒng)：TMB底物液、終止液(2N H?SO?)

　　二、實(shí)驗(yàn)步驟

　　樣本準(zhǔn)備

　　植物組織研磨后離心(12,000×g，15分鐘)，取上清液用樣品稀釋液1:5稀釋

　　避免反復(fù)凍融樣本，建議分裝保存于-80℃

　　加樣與孵育

　　每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本，37℃避光孵育90分鐘

　　洗滌5次(每次30秒)，拍干殘留液滴

　　檢測(cè)抗體反應(yīng)

　　加入生物素化抗體工作液(100μL/孔)，37℃孵育60分鐘

　　洗滌后加入HRP-親和素(100μL/孔)，37℃孵育30分鐘

　　顯色與讀數(shù)

　　加入TMB底物液(100μL/孔)，避光反應(yīng)15分鐘

　　加入終止液(50μL/孔)，450nm波長(zhǎng)讀取OD值

　　三、注意事項(xiàng)

　　試劑平衡：使用前需室溫平衡30分鐘，避免冷凝水干擾

　　交叉污染：更換槍頭/孔位，避免標(biāo)準(zhǔn)品與樣本交叉污染

　　數(shù)據(jù)有效性：標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.98，樣本OD值需在曲線范圍內(nèi)

　　安全防護(hù)：終止液含強(qiáng)酸，需佩戴手套操作

　　四、結(jié)果分析

　　繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(濃度 vs. OD值)，擬合四參數(shù)邏輯方程

　　樣本濃度=(OD值-空白孔均值)/標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率×稀釋倍數(shù)

　　注意：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒　

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